PCR实验室

PCR实验室

又叫基因扩增实验室。PCR是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称。是一种分子生物学技术，用于放大特定的DN***段，可看作生物体外的特殊DNA复制。通过DNA基因追踪系统，能迅速掌握患者体内的病毒含量，其精确度高达纳米级别，精确检测乙肝病毒在患者体内存在的数量、是否复制、是否传染、传染性有多强、是否必要服药、肝功能有否异常改变能及时判断病人最适合使用哪类抗病毒药物、判断药物疗效如何、给临床治疗提供了可靠的检验依据。

PCR实验室技术要求

标准PCR实验室建设--设计要点

主体结构

目前实验室的主体多为彩钢板、铝合金型材。室内所有阴角、阳角均采用铝合金R50内圆角铝，从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题。并且彩钢板结构牢固，线条简明，美观大方，密封性好。

标准四区分隔和气压调节

将PCR过程分成试剂准备、标本制备和PCR扩增区及产物分析检测区四个独立的试验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个独立试验区设置有缓冲区，同时各区通过气压调节，使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。

消毒

在四个实验区和四个缓冲区顶部以及传递窗内部安装紫外线灯，供消毒用。在试剂准备区还设置移动紫外线灯对实验桌进行局部消毒。

机械连锁不锈钢传递窗

试剂和标本通过机械连锁不锈钢（不建议使用电子连锁方式）传递窗传递，保证试剂和标本在传递过程中不受污染（人物分流）。

地面

地面建议使用PVC卷材地面或自流平地面，整体性好。便于进行清扫，耐腐蚀。没有条件的也可采用水磨石地面，或大块的瓷砖（至少800mm*800mm）接缝需小于2mm。

PCR实验室平面规划图

标准PCR实验室建设--空气流和压差要求

▅ PCR实验室的空气流向必须严格按照试剂储存和准备去→扩增区→扩增产物分析区空气压力逐渐递减方式进行，防止扩增产物空气气流进入扩增前的区域。

▅ 空气洁净级别不同的的相邻的房间之间中的静压差大于5帕，洁净室（区）与室外大气的静压差应大于10帕，应配备监测静压的设备，并定期监控。

标准PCR实验室建设--洁净装修要求

▅ 洁净室（区）的内表面应平整光滑、无裂缝、借口严密、无颗粒物脱落，并能耐受清洗和消毒，墙壁与地面的交界处宜成弧形或采取其他措施，以减少灰尘积聚和便于清洁。

▅ 洁净室（区）内各种管道、灯具、风口以及其他公用设施，在设计和安装时应考虑使用中避免出现不易清洁的部位。

▅ 洁净室（区）的窗户、天棚及进入室内的管道、风口、灯具与墙壁或天棚的连接部位均应密封。

PCR实验室基本由五大结构组成，常见为：pcr走廊、准备区、制备区、扩增区和扩增分析区。

▅ 准备区

实验所需试剂的准备工作，分装等，由传递窗运送至制备区，严谨走人员通道。

▅ 制备区

主要进行样品等保存，rna\dna的提取、贮存和其加入至扩增反应管和测定rna\dna的合成。

▅ 扩增区

dna的扩增，以制备的dna模版和合成的cDNA的加入和主板反应混合液制备成反应混合液等也可在扩增区内进行，在巢式pcr测定中，通常在第一轮扩增后必须打开反应管，因此巢式扩增有较高等污染危害性，第二次加样必须在本区完成。

▅ 扩增分析

主要用来做扩增产物的测定，本区是主要的扩增产物污染来源，因此必须主意避免通过本区的物品或者工作服将扩增产物带出。